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尼龙膜、PVDF膜、NC膜区别你知多少?

时间:2015-11-19 18:03来源:生物吧 作者:管理员 点击:
结合能力: 带正电的尼龙膜 PVDF 膜 硝酸纤维素膜 。 尼龙膜结合 DNA 和 RNA 能力可达 480 - 600 g/cm2 ,可结合短至 10bp 的核酸片段;硝酸纤维素膜结合 DNA 和 RNA 能力可达 80 - 100 g/cm2 ,对
  • 结合能力:带正电的尼龙膜>PVDF>硝酸纤维素膜

尼龙膜结合DNARNA能力可达480600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸片段;硝酸纤维素膜结合DNARNA能力可达80100μg/cm2,对于200bp的核酸片段结合能力不强;PVDF膜结合DNARNA能力可达125300μg/cm2

  • 结合稳定性

更好的机械强度和化学耐受性使PVDF膜在各种染色应用和多重免疫检测中成为理想选择;而且单个凝胶的泳道复本可用于多种目的,特别是需要做N端蛋白测序,在相当“严酷”的清洗条件下,当尼龙膜或者硝酸纤维素膜已经降解的情况下PVDF膜依然保持本色,所以PVDF也是要做蛋白测序的唯一选择,但不适合荧光。PVDF膜特别注意的是需要100%甲醇预处理(不超过15)再用缓冲液平衡,才能用。

  • 温度耐受性:

尼龙膜经烘烤或紫外线照射后,核酸中的部分嘧啶碱基可与膜上的正电荷结合;硝酸纤维素膜依靠疏水性相互作用结合DNA,结合不牢固;PVDF膜结合牢固,耐高温,特别适合于蛋白印迹。

  • 机械强度:

硝酸纤维素膜较脆,易破碎,不能重复使用;尼龙膜和PVDF膜机械强度较高,可重复使用。

  • 价格比较:PVDF>硝酸纤维素膜>尼龙膜

  • 可重复性:

尼龙膜可反复用于分子杂交,杂交后,探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。

  • 操作简便性

NC膜的使用很简便,比如不需要甲醛预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途。

  • 背景:NC膜和PVDF背景较低;尼龙膜背景高。
     

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