大家好：请问有人用过GIBCO的neurobasal 培养基吗？这种培养基PH值是7.1，渗透压是225，但是很容易就变碱了，GIBCO公司建议不加HEPES，你们遇到过这种情况吗〉、？怎么处理的

答1：我们一直用GIBCO的neurobasal培养基，也碰到类似的情况，用一段时间后，培养基的颜色明显和刚买来的时候不一样，变红很多，但我感觉下来对细胞影响不大，并没有碰到细胞养不好的情况。
我们是用时和B27按比例配好，分装到50ml离心管中使用。另外neurobasal要避光保存。我们没有加HEPES，而是拿来直接用的

答2：这个培养基的渗透压很低，买回来是225加双抗和谷氨酰胺后还是很低，不到240吧，这个渗透压对细胞好吗？正常是280-320。 、

答3：渗透压我们没有测过，所以不太清楚它对细胞的影响究竟如何？但我想公司应该考虑了渗透压的问题了吧，所以应该可以拿来用的。如果你养的是原代细胞，培养基不是关键问题，分离消化到好的细胞才是细胞能不能养好的关键。我的感觉是这样，有问题大家互相交流，共同进步。呵呵

答4：我养的是皮层神经元，第7天时发现有些孔的细胞变暗了，有些孔还可以。请问你有没有遇到这种情况？你们用这个培养基养出的细胞状态一直都很好吗？我接种的密度是300000--500000，接种前没用胎盘兰计算活细胞数。